行業(yè)信息
透射電鏡(TEM)是研究線粒體超微結(jié)構(gòu)的金標(biāo)準(zhǔn),可清晰顯示其雙層膜結(jié)構(gòu)、嵴形態(tài)及病理變化。xiam 是關(guān)鍵分析內(nèi)容及方法:
一、線粒體正常超微結(jié)構(gòu)特征
?雙層膜結(jié)構(gòu)?
外膜:光滑連續(xù),含孔蛋白通道(直徑約2-3nm),允許小分子自由通過?
內(nèi)膜:向內(nèi)折疊形成折疊形成嵴,嵴類型分為板層狀(哺乳動(dòng)物常見)和小管狀(類固醇激素分泌細(xì)胞多見)?
?嵴形態(tài)分類?
板層嵴:平行排列的扁平囊泡狀結(jié)構(gòu)(如肝細(xì)胞線粒體)?
小管嵴:相互連接的管狀結(jié)構(gòu)(如腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞)?
?基質(zhì)與膜間隙?
基質(zhì)含電子致密顆粒(基粒)和線粒體DNA,膜間隙含可溶性酶?
二、常見病理形態(tài)變化
?腫脹與空泡化?
基質(zhì)腫脹:嵴變短/消失,基質(zhì)電子密度降低(缺氧、中毒常見)?
外室腫脹:嵴間隙擴(kuò)張,基質(zhì)濃縮(鉀離子遷移導(dǎo)致)?
?固縮與凝聚?
體積縮小,基質(zhì)電子密度增高(細(xì)胞凋亡標(biāo)志)?
?肥大與增生?
肥大:體積增大但嵴結(jié)構(gòu)正常(心肌代償性改變)?
增生:數(shù)量增多(如骨骼肌肥大)?
三、分析流程與注意事項(xiàng)
?樣本制備?
需采用戊二醛-鋨酸雙重固定,超薄切片(60-80nm)?
?觀察要點(diǎn)?
注意嵴的連續(xù)性(小管嵴易誤判為泡狀)?
結(jié)合細(xì)胞定位(如心肌線粒體靠近肌原纖維I帶)?
?定量分析?
使用ImageJ測(cè)量線粒體面積、嵴密度等參數(shù)?
四、特殊形態(tài)案例
?巨線粒體?:長(zhǎng)度可達(dá)40μm(人類成纖維細(xì)胞)或80μm(煙草植物低氧適應(yīng))?
?自噬體包裹?:損傷線粒體與溶酶體融合形成嗜鋨板層小體?
注:分析時(shí)需排除饑餓等生理性改變導(dǎo)致的假性病變?
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