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細胞生物平臺

NTA檢測

儀器型號

Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等

預(yù)約次數(shù):56352次
新客專享:首單立減200元
測試收費:溝通
詳細介紹
 
項目介紹
 
 利用NTA檢測儀(Zetaview(Particle Metrix))快速、穩(wěn)定地進行外泌體粒徑、濃度鑒定。其方法原理即納米顆粒跟蹤分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA),單一顆粒跟蹤技術(shù)并結(jié)合經(jīng)典微電泳技術(shù)(zeta電位)和布朗運動,利用Stockes-Einstein方程式計算出納米顆粒的流體力學(xué)直徑和濃度。
 
樣本要求
 
(1) 接收質(zhì)量較好、純度較高的外泌體、生物微粒、納米粒、脂質(zhì)體等多種樣品,粒徑分布在30-1000nm,原液濃度在10^6左右;樣品粒徑不能太分散。
(2)樣品量至少準備35uL,干冰郵寄。
服務(wù)周期:
一般為樣品接收后的1周,具體實驗周期及送樣時間請與e測試工作人員溝通確認,謝謝!
交付內(nèi)容:
測試報告、微顆粒運動軌跡視頻
 
結(jié)果展示
 
 
常見問題
 
 question
1、外泌體如何保存?
不同時間、溫度的保存對不同的外泌體樣本影響不一;如果研究方向為外泌體形態(tài)特征、蛋白或其他功能性分析,在分離后新鮮使用為z佳。目前主流的建議是提取出外泌體后z好是新鮮使用,或低溫短期保存。
短時間幾天內(nèi)可以放4°C,長時間儲存置于-80°C保存。
question
2、外泌體分離各種方法優(yōu)缺點有哪些?
超速離心法(差速離心和密度梯度離心):操作繁瑣,耗時長,分離外泌體純度較高,但得率低,目前分離外泌體主流方法。
尺寸排阻色譜(Size-exclusion chromatography,SEC):應(yīng)用填充多孔聚合物微球的柱子,精確分離大小分子,操作簡便,耗時短,分離外泌體純度較高。
聚合物沉淀法:操作簡便,耗時短,可能會同時分離非囊泡污染物(包括脂蛋白),分離外泌體純度較低。
磁珠免疫法:通過特定的抗體組合從樣本中捕獲不同類型的外泌體,免疫親和技術(shù)具有高特異性、可獲得高純度的外泌體、且不影響外泌體形態(tài)完整等優(yōu)點,是富集表征獨特的外泌體的優(yōu)選方法。但是此方法效率低,外泌體內(nèi)含物的生物活性易受pH和鹽濃度影響,不利于下游實驗的進行。
組合方法:如聚合物沉淀法+SEC (CellGS Exo-spin 外泌體純化試劑盒)純化流程溫和,無需高速離心,操作簡便并且產(chǎn)物純度高,分離出的外泌體完好無缺,適用于下游功能研究、WB驗證、RNA分析等。
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