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細(xì)胞生物平臺(tái)

細(xì)胞遷移/侵襲實(shí)驗(yàn)

儀器型號(hào)

Hitachi Regulus8100,Sigma 300;Zeiss Gemini 300; Hitachi S4800;JSM-7800F;蔡司 Supra 55等

預(yù)約次數(shù):58654
新客專享:首單立減200元
測(cè)試收費(fèi):溝通
詳細(xì)介紹
 
項(xiàng)目介紹
 
細(xì)胞遷移 (cell migration) 也稱為細(xì)胞爬行、細(xì)胞移動(dòng)或細(xì)胞運(yùn)動(dòng),是指細(xì)胞在接收到遷移信號(hào)或感受到某些物質(zhì)的梯度后而產(chǎn)生的移動(dòng)。細(xì)胞遷移為細(xì)胞頭部偽足的延伸、新的黏附建立、細(xì)胞體尾部收縮在時(shí)空上的交替過程。細(xì)胞遷移是正常細(xì)胞的基本功能之一,是機(jī)體正常生長(zhǎng)發(fā)育的生理過程,也是活細(xì)胞普遍存在的一種運(yùn)動(dòng)形式。胚胎發(fā)育、血管生成、傷口愈合、免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、動(dòng)脈粥樣硬化、癌癥轉(zhuǎn)移等過程中都涉及細(xì)胞遷移。
1、細(xì)胞劃痕
細(xì)胞劃痕(修復(fù))法是一種簡(jiǎn)捷的測(cè)定細(xì)胞遷移運(yùn)動(dòng)與修復(fù)能力的方法,類似體外傷口愈合模型,在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上,使用槍頭或者其他硬物在單層細(xì)胞的中央?yún)^(qū)劃線,去除中央部分的細(xì)胞,然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時(shí)間(采用低血清或者無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)以排除細(xì)胞增殖的影響),取出細(xì)胞培養(yǎng)板,觀察周邊細(xì)胞是否生長(zhǎng)(修復(fù))至中央劃痕區(qū),以此判斷細(xì)胞的生長(zhǎng)遷移能力,服務(wù)流程如下:
準(zhǔn)備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺(tái)內(nèi))
 (1)先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃?rùn)M線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
  (2)在空中加入約5X105個(gè)細(xì)胞,具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同,掌握為過夜能鋪滿。
  (3)第二天用槍頭比著直尺,盡量垂至于背后的橫線劃痕,槍頭要垂直,不能傾斜。
  (4)用PBS洗細(xì)胞3次,去處劃下的細(xì)胞,加入無血清培養(yǎng)基。
  (5)放入37度5%CO2培養(yǎng)箱,培養(yǎng)。按0,6,12,24小時(shí)取樣,拍照。
2、細(xì)胞侵襲
細(xì)胞遷移與侵襲實(shí)驗(yàn)將Transwell小室放入培養(yǎng)板中,小室內(nèi)稱上室,培養(yǎng)板內(nèi)稱下室,上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液,下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液,上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。將細(xì)胞種在上室內(nèi),由于聚碳酸酯膜有通透性,下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)的細(xì)胞,從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)等的影響。應(yīng)用不同孔徑和經(jīng)過不同處理的聚碳酸酯膜,就可以進(jìn)行共培養(yǎng)、細(xì)胞趨化、細(xì)胞遷移、細(xì)胞侵襲等多種方面的研究,服務(wù)流程如下:
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樣本要求
 
待測(cè)樣品(濃度客戶指定)、具體實(shí)驗(yàn)方案與要求;涉及到的細(xì)胞、耗材試劑盒本實(shí)驗(yàn)室均可有償提供。
 
結(jié)果展示
 
交付內(nèi)容:完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告及拍攝圖片

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常見問題
 
question
如何選擇細(xì)胞劃痕法或Transwell法?
細(xì)胞劃痕:適用貼壁細(xì)胞的創(chuàng)傷愈合;
Transwell法:構(gòu)建細(xì)胞共培養(yǎng)體系;趨化性實(shí)驗(yàn);腫瘤遷移/侵襲實(shí)驗(yàn)。

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