冷凍透射電子顯微鏡(Cryogenic Transmission Electron Microscopy, Cryo-TEM)是一種先進(jìn)的生物物理學(xué)和結(jié)構(gòu)生物學(xué)研究工具,它能夠在低溫(接近液氮溫度,即約-196℃)下對(duì)樣品進(jìn)行快速冷凍固定,從而保持其天然狀態(tài)下的水合環(huán)境和生物活性構(gòu)象。在這樣的條件下,對(duì)易失活或變形的生物大分子(如蛋白質(zhì)、核酸、脂質(zhì)體以及整個(gè)細(xì)胞等)進(jìn)行成像時(shí),能夠z大限度地減少電子束照射帶來(lái)的輻射損傷。
冷凍透射電鏡的工作原理與常規(guī)透射電鏡相似,但額外配備了冷凍樣品臺(tái)和一套精密的冷凍制樣系統(tǒng)。樣品首先迅速冷凍并在液態(tài)乙烷或液氮中迅速投入揮發(fā)性溶液中形成玻璃態(tài)冰,這樣可以避免形成破壞樣品結(jié)構(gòu)的大冰晶。然后,冷凍樣品被轉(zhuǎn)移至顯微鏡內(nèi)的真空環(huán)境中,在極低溫度下,電子束穿透樣品并被檢測(cè)器捕捉,進(jìn)而生成高分辨率的二維投影圖像。通過(guò)計(jì)算機(jī)重構(gòu)技術(shù),可以從多個(gè)角度獲取的二維投影圖像重建出三維結(jié)構(gòu)信息。
1.送樣要求
1)水溶液樣品,體積200微升,要求濃度比常溫測(cè)試大100-1000倍。含有機(jī)溶劑的樣本,送樣前請(qǐng)與e測(cè)試工作人員溝通。
2)粉末要求5-10mg,分散劑默認(rèn)是水,粉末粒度不超1um。
3)不測(cè)揮發(fā)有毒有磁性放射性樣品。
2.服務(wù)周期:一般為樣品接收后的1-2周左右,如遇法定假期需要順延,具體實(shí)驗(yàn)周期及送樣時(shí)間請(qǐng)與e測(cè)試工作人員溝通確認(rèn),謝謝!
3.交付內(nèi)容:每樣提供10張拍攝圖片(不提供分析服務(wù)),如需照片數(shù)量超過(guò)將產(chǎn)生額外費(fèi)用;
結(jié)果反饋請(qǐng)?jiān)跍y(cè)試完成一周內(nèi),不建議回收樣品,如有需要請(qǐng)?zhí)崆胺答伣oe測(cè)試工作人員。
哪些樣本需要拍冷凍透射電鏡?
生物大分子、病毒顆粒、細(xì)胞亞結(jié)構(gòu)、納米材料等需要在接近自然狀態(tài)下維持其三維結(jié)構(gòu)以進(jìn)行高分辨率成像的生物樣品,尤其當(dāng)它們無(wú)法承受常規(guī)電鏡所需的干燥、染色或其他處理步驟時(shí),都是冷凍透射電鏡的理想研究對(duì)象。通過(guò)快速冷凍技術(shù),樣品能夠被固定在一種類(lèi)似于“玻璃態(tài)”的水中,避免了冰晶的形成和結(jié)構(gòu)扭曲,從而保持其生物活性狀態(tài)下的結(jié)構(gòu)完整性。