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免疫組化(Immunohistochemistry,IHC)是一種在組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)中廣泛應(yīng)用的技術(shù),它利用抗原-抗體反應(yīng)的特異性來檢測(cè)和定位組織或細(xì)胞中的特定蛋白質(zhì)。免疫組化技術(shù)不僅可以用于定性檢測(cè),還可以進(jìn)行相對(duì)定量分析,是現(xiàn)代病理學(xué)、分子生物學(xué)和臨床診斷中不可或缺的工具。
免疫組化的基本步驟通常包括:
樣本制備:組織樣本通常需要進(jìn)行固定、包埋(如石蠟包埋)和切片處理,以便后續(xù)的操作。
脫蠟和水化:如果是石蠟包埋的樣本,需要通過有機(jī)溶劑去除石蠟,并逐步用水化來恢復(fù)組織的親水性。
抗原修復(fù):為了提高抗體的識(shí)別效率,可能需要通過熱誘導(dǎo)、酶消化等方式來修復(fù)或暴露抗原表位。
封閉非特異性結(jié)合位點(diǎn):使用血清或蛋白質(zhì)溶液封閉組織上的非特異性結(jié)合位點(diǎn),以減少背景染色。
一抗孵育:將樣本與特異性抗體(一抗)在適宜條件下孵育,使抗體與目標(biāo)抗原結(jié)合。
清洗:去除未結(jié)合的抗體,準(zhǔn)備下一步操作。
標(biāo)記和顯色:使用標(biāo)記的二抗或標(biāo)記的一抗,通過酶促反應(yīng)、熒光標(biāo)記等手段進(jìn)行顯色,以可視化抗原-抗體復(fù)合物。
復(fù)染:為了增加樣本的對(duì)比度,可能會(huì)使用復(fù)染劑,如蘇木精,對(duì)細(xì)胞核進(jìn)行染色。
封片:使用封片劑將樣本y久固定在載玻片上,以便長(zhǎng)期保存和觀察。
觀察和分析:使用光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡觀察染色結(jié)果,進(jìn)行圖像記錄和分析。
免疫組化在臨床上的應(yīng)用主要包括:
腫瘤的診斷與鑒別診斷
確定轉(zhuǎn)移性腫瘤的原發(fā)部位
腫瘤的病理分型
軟組織腫瘤的診斷和分類
微小轉(zhuǎn)移灶的檢測(cè)
評(píng)估腫瘤的預(yù)后和指導(dǎo)治療方案的選擇
在科研領(lǐng)域,免疫組化也是研究蛋白質(zhì)表達(dá)、定位和功能的重要工具。
免疫組化染色的費(fèi)用因地區(qū)、醫(yī)院、檢測(cè)項(xiàng)目數(shù)量以及是否采用自動(dòng)化設(shè)備等因素而異。
如果涉及多個(gè)檢測(cè)項(xiàng)目,總費(fèi)用可能會(huì)顯著增加,因?yàn)槊總€(gè)額外的抗體或標(biāo)記都需要額外的費(fèi)用。有些醫(yī)院或?qū)嶒?yàn)室可能會(huì)提供套餐服務(wù),針對(duì)特定類型的疾病(如癌癥)進(jìn)行一系列相關(guān)檢測(cè),這種情況下總費(fèi)用可能高點(diǎn)。
如果您需要進(jìn)行免疫組化染色,建議直接聯(lián)系您所在地區(qū)的醫(yī)療機(jī)構(gòu)或者檢測(cè)機(jī)構(gòu)比如e測(cè)試,獲取價(jià)格信息詳情。
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