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血清代謝組學(xué)檢測(cè)是代謝組學(xué)研究中常用、成熟的生物樣本類型之一。血清作為血液去除凝血因子后的液體部分,富含來自全身各組織器官的小分子代謝物(如氨基酸、脂質(zhì)、糖類、有機(jī)酸、膽汁酸等),能夠系統(tǒng)反映機(jī)體的生理狀態(tài)、疾病進(jìn)程、藥物響應(yīng)及環(huán)境暴露。
血清代謝組學(xué)檢測(cè)是一種通過分析血清中小分子代謝物(分子量通常小于1500 Da)的組成與動(dòng)態(tài)變化,揭示生物體生理病理狀態(tài)及代謝調(diào)控機(jī)制的研究方法?。以下是其核心要點(diǎn):
一、定義與基本原理
?定義?:作為系統(tǒng)生物學(xué)分支,該技術(shù)通過檢測(cè)氨基酸、脂肪酸、糖類等代謝物,反映基因、蛋白質(zhì)等上游分子變化的z終生物學(xué)效應(yīng)?。
?原理?:代謝物水平受酶活性、環(huán)境等因素調(diào)控,疾病或外界刺激會(huì)導(dǎo)致代謝網(wǎng)絡(luò)重塑,進(jìn)而引發(fā)代謝物譜改變?。
二、技術(shù)流程
?樣本采集與預(yù)處理?
樣本類型:血清需空腹采集,迅速冷凍(-80℃)保存,避免代謝物降解?。
預(yù)處理:包括蛋白沉淀(如甲醇/乙腈)、固相萃取等,以提高檢測(cè)靈敏度?。
?代謝物分離與檢測(cè)?
主流技術(shù):
?LC-MS?:適用于極性大、熱不穩(wěn)定的代謝物(如核苷酸、有機(jī)酸),常搭配高分辨質(zhì)譜提高準(zhǔn)確性?。
?GC-MS?:適合揮發(fā)性代謝物(如脂肪酸衍生物),需衍生化處理?。
非靶向篩查推薦LC-MS,靶向定量建議三重四極桿質(zhì)譜?。
?數(shù)據(jù)分析?
包括降噪、歸一化、特征提取及PCA質(zhì)控(QC樣本需密集分布)?。
代謝物鑒定通過數(shù)據(jù)庫(kù)匹配質(zhì)譜圖,通路分析采用多元統(tǒng)計(jì)及富集方法?5。
三、應(yīng)用場(chǎng)景
?疾病診斷?:如異位妊娠中篩選特異性生物標(biāo)志物?,或肝硬化患者的膽汁酸譜變化?。
?機(jī)制研究?:解析藥物對(duì)代謝通路的影響,如化療抑制糖酵解?
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