腦組織HE(蘇木精-伊紅)染色是神經(jīng)病理學(xué)診斷的核心技術(shù)，能夠直觀展示神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞及血管的形態(tài)學(xué)特征。本文系統(tǒng)闡述腦組織HE染色切片制備的技術(shù)規(guī)范、常見(jiàn)病理變化的識(shí)別要點(diǎn)，并結(jié)合實(shí)際案例分析其臨床應(yīng)用價(jià)值，旨在為神經(jīng)疾病診斷、科研及藥物研發(fā)提供可靠的技術(shù)支持。

　　一、腦組織HE染色技術(shù)原理與操作規(guī)范

　　1. 染色原理

　　蘇木精(Hematoxylin)：堿性染料，與細(xì)胞核內(nèi)DNA/RNA結(jié)合，顯藍(lán)紫色，突出核染色質(zhì)、核仁及尼氏體結(jié)構(gòu)。

　　伊紅(Eosin)：酸性染料，結(jié)合細(xì)胞質(zhì)蛋白及膠原纖維，顯粉紅色，清晰標(biāo)記胞質(zhì)、軸突及血管基質(zhì)。

　　2. 標(biāo)準(zhǔn)化操作流程

　　(1) 樣本制備

　　取材：新鮮腦組織(尸檢或手術(shù)樣本)需快速固定(10%中性緩沖福爾馬林，24~48小時(shí))，避免自溶。

　　脫水包埋：梯度乙醇脫水(70%~100%)，二甲苯透明，石蠟包埋(控制溫度≤60℃以防組織脆化)。

　　切片：厚度4~5μm，白質(zhì)區(qū)域需降低切片速度以減少刀痕。

　　(2) HE染色步驟

　　(3) 質(zhì)量控制

　　染色對(duì)比度：核質(zhì)分明(核深藍(lán)、胞質(zhì)粉紅)，尼氏體顆粒清晰。

　　常見(jiàn)問(wèn)題：

　　過(guò)染：分化不足導(dǎo)致背景深染→延長(zhǎng)鹽酸乙醇處理時(shí)間。

　　褪色：脫水不徹底→確保乙醇梯度充分。

　　二、腦組織正常結(jié)構(gòu)與病理特征解析

　　1. 正常腦組織HE染色特征

　　神經(jīng)元：

　　胞體飽滿(mǎn)，核大居中，核仁明顯(海馬錐體細(xì)胞、小腦Purkinje細(xì)胞為典型代表)。

　　尼氏體(粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng))呈藍(lán)紫色顆粒，分布于胞質(zhì)周邊。

　　膠質(zhì)細(xì)胞：

　　星形膠質(zhì)細(xì)胞：核淡染，胞質(zhì)不易見(jiàn)(需GFAP免疫組化輔助)。

　　少突膠質(zhì)細(xì)胞：核小圓、深染，沿軸突束排列。

　　血管：內(nèi)皮細(xì)胞扁平，周細(xì)胞環(huán)繞，血管周?chē)g隙(Virchow-Robin腔)清晰。

　　2. 典型病理變化識(shí)別

　　(1) 神經(jīng)元損傷

　　缺血性改變(紅色神經(jīng)元)：核固縮、胞質(zhì)嗜酸性增強(qiáng)(急性梗死標(biāo)志)。

　　神經(jīng)原纖維纏結(jié)：胞質(zhì)內(nèi)細(xì)絲狀包涵體(阿爾茨海默病特征，需tau蛋白染色確認(rèn))。

　　空泡變性：胞質(zhì)內(nèi)邊界清晰的空泡(朊病毒病、線粒體腦病)。

　　(2) 膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)

　　反應(yīng)性膠質(zhì)增生：星形膠質(zhì)細(xì)胞肥大(胞質(zhì)豐富，GFAP+)，見(jiàn)于創(chuàng)傷或慢性缺氧。

　　膠質(zhì)結(jié)節(jié)：小膠質(zhì)細(xì)胞聚集形成“微膠質(zhì)結(jié)節(jié)”(病毒性腦炎特異性改變)。

　　(3) 血管與炎癥病變

　　血管炎：血管壁纖維素樣壞死，周?chē)馨图?xì)胞浸潤(rùn)(自身免疫性腦炎)。

　　淀粉樣血管?。貉鼙诰|(zhì)粉染物質(zhì)沉積(剛果紅染色陽(yáng)性)。

　　(4) 腫瘤性病變

　　膠質(zhì)瘤：細(xì)胞密度增高，核異型性，假柵欄狀壞死(膠質(zhì)母細(xì)胞瘤)。

　　轉(zhuǎn)移瘤：異型上皮細(xì)胞團(tuán)(需結(jié)合CK、TTF-1等免疫標(biāo)記)。

　　三、臨床應(yīng)用案例分析

　　案例1：腦梗死病理診斷

　　病史：男性，68歲，突發(fā)偏癱，MRI顯示左側(cè)大腦中動(dòng)脈供血區(qū)異常信號(hào)。

　　HE表現(xiàn)：

　　神經(jīng)元嗜酸性變，核碎裂(紅色神經(jīng)元)。

　　間質(zhì)水腫，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)(急性期)。

　　診斷：急性缺血性腦梗死。

　　案例2：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤鑒別

　　病史：女性，45歲，頭痛伴癲癇發(fā)作，CT示右額葉占位。

　　HE表現(xiàn)：

　　細(xì)胞密集，核多形性，血管內(nèi)皮增生。

　　假柵欄狀壞死(腫瘤細(xì)胞圍繞壞死區(qū)放射狀排列)。

　　輔助檢查：IDH1突變陰性，EGFR擴(kuò)增陽(yáng)性。

　　診斷：膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(WHO IV級(jí))。

　　四、技術(shù)優(yōu)勢(shì)與創(chuàng)新應(yīng)用

　　1. 高分辨率制片技術(shù)

　　采用低溫包埋與超薄切片(3μm)，提升海馬齒狀回、腦干核團(tuán)等細(xì)微結(jié)構(gòu)顯示度。

　　2. 多平臺(tái)聯(lián)合驗(yàn)證

　　HE染色與特殊染色(LFB髓鞘染色)、免疫組化(GFAP、NeuN)聯(lián)動(dòng)，實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)分型。

　　3. 數(shù)字化病理分析

　　全切片掃描(Whole Slide Imaging)結(jié)合AI算法，定量神經(jīng)元密度與膠質(zhì)增生指數(shù)。

　　五、質(zhì)量控制體系

　　標(biāo)準(zhǔn)化流程：依據(jù)CAP(美國(guó)病理學(xué)家協(xié)會(huì))指南建立SOP文件。

　　人員認(rèn)證：病理醫(yī)師通過(guò)Neuropathology Board認(rèn)證，技術(shù)員持ISO15189內(nèi)審資格。

　　設(shè)備校準(zhǔn)：切片機(jī)精度≤1μm，染色機(jī)溫控誤差±0.5℃。