氨基酸是構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位，不僅關(guān)系到人體的健康狀況，還是人體進(jìn)行正常代謝所必需的物質(zhì)。目前已知的氨基酸有300多種，但存在于天然食物中的只有20多種。氨基酸含量的測試方法有多種，以下是幾種常見的方法：

　　1. 高效液相色譜法(HPLC)

　　原理：利用高效液相色譜分離氨基酸，通過紫外或熒光檢測器測定其含量。

　　步驟：

　　樣品前處理：將樣品水解或提取，釋放氨基酸。

　　衍生化處理：將氨基酸與衍生化試劑反應(yīng)，生成可檢測的衍生物。

　　使用HPLC儀分離氨基酸衍生物，通過檢測器測定其含量。

　　分析色譜圖，定量測定氨基酸含量。

　　優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，分離效果好。

　　缺點(diǎn)：操作復(fù)雜，需衍生化處理。

　　2. 氨基酸分析儀法

　　原理：專用氨基酸分析儀通過離子交換色譜分離氨基酸，采用茚三酮顯色法測定其含量。

　　步驟：

　　樣品前處理：將樣品水解或提取，釋放氨基酸。

　　使用氨基酸分析儀分離氨基酸，通過茚三酮顯色反應(yīng)測定其含量。

　　分析色譜圖，定量測定氨基酸含量。

　　優(yōu)點(diǎn)：專一性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確。

　　缺點(diǎn)：設(shè)備昂貴，操作復(fù)雜。

　　3. 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)

　　原理：通過氣相色譜分離氨基酸衍生物，質(zhì)譜鑒定其分子結(jié)構(gòu)，測定其含量。

　　步驟：

　　樣品前處理：將樣品水解或提取，釋放氨基酸。

　　衍生化處理：將氨基酸與衍生化試劑反應(yīng)，生成可揮發(fā)的衍生物。

　　使用GC-MS儀分離氨基酸衍生物，通過質(zhì)譜鑒定和定量。

　　分析質(zhì)譜圖，定量測定氨基酸含量。

　　優(yōu)點(diǎn)：靈敏度高，可鑒定多種氨基酸。

　　缺點(diǎn)：操作復(fù)雜，需衍生化處理。

　　4. 紫外-可見分光光度法

　　原理：利用氨基酸與特定試劑反應(yīng)生成有色物質(zhì)，通過紫外-可見分光光度計(jì)測定其吸光度，計(jì)算氨基酸含量。

　　步驟：

　　樣品前處理：將樣品水解或提取，釋放氨基酸。

　　顯色反應(yīng)：將氨基酸與顯色試劑反應(yīng)，生成有色物質(zhì)。

　　使用紫外-可見分光光度計(jì)測定吸光度。

　　根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算氨基酸含量。

　　優(yōu)點(diǎn)：操作簡便，成本低。

　　缺點(diǎn)：靈敏度較低，選擇性較差。

　　5. 酶法

　　原理：利用特定酶與氨基酸反應(yīng)，通過測定反應(yīng)產(chǎn)物的量來計(jì)算氨基酸含量。

　　步驟：

　　樣品前處理：將樣品水解或提取，釋放氨基酸。

　　酶反應(yīng)：將氨基酸與特定酶反應(yīng)，生成可檢測的產(chǎn)物。

　　使用分光光度計(jì)或熒光計(jì)測定反應(yīng)產(chǎn)物的量。

　　根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算氨基酸含量。

　　優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)，靈敏度高。

　　缺點(diǎn)：酶試劑昂貴，操作復(fù)雜。