行業(yè)信息
使用BCA試劑盒進(jìn)行蛋白含量測定—BCA測定方法如下:
① 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制;
?、?根據(jù)樣品數(shù)量,按 BCA 試劑 A :BCA 試劑 B(50:1)配制適量 BCA 工作液,充分混勻;
③各孔加入 200μL BCA 工作液;
?、馨衙笜?biāo)板放在振蕩器上振蕩 30sec,37℃放置 30 min,然后在 562nm 下比色測定。以蛋白含量(μg)為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線;
?、菹♂尨郎y樣品至合適濃度,使樣品稀釋液總體積為 20μL,加入 BCA 工作液 200μL,充分混勻,37℃放置 30 min后,以標(biāo)準(zhǔn)曲線 0 號管做參比,在 562nm 波長下比色,記錄吸光值;
?、? 根據(jù)所測樣品的吸光值,在標(biāo)準(zhǔn)曲線上即可查得相應(yīng)的蛋白含量(μg),除以樣品稀釋液總體積(20μL),乘以樣品稀釋倍數(shù)即為樣品實際濃度(單位:μg/μL)。
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