行業(yè)信息
分子互作檢測是在分子生物學(xué)、生物化學(xué)以及藥理學(xué)等領(lǐng)域中至關(guān)重要的技術(shù),用于研究生物分子之間(如蛋白質(zhì)、DNA、RNA、抗體、小分子配體等)的相互作用。這些相互作用對于理解生物過程、疾病機制、藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)等方面至關(guān)重要。
分子互作檢測技術(shù)種類繁多,每種技術(shù)都有其特定的應(yīng)用場景和優(yōu)缺點。以下是一些常見的分子互作檢測技術(shù):
這是檢測生物分子相互作用的“金標(biāo)準(zhǔn)”,無需標(biāo)記,實時監(jiān)測,高靈敏度。SPR通過監(jiān)測光在金屬表面反射時產(chǎn)生的等離子共振現(xiàn)象的變化來檢測分子結(jié)合事件。
Biacore分子互作系統(tǒng)
Biacore是SPR技術(shù)的一種商業(yè)化應(yīng)用,廣泛用于藥物篩選和動力學(xué)分析。
BLI通過測量生物膜的光學(xué)厚度變化來檢測分子間的相互作用。
微量熱泳動(MST)
MST利用激光誘導(dǎo)的溫度梯度導(dǎo)致的分子遷移率變化來研究分子間相互作用。
ITC直接測量結(jié)合過程中釋放或吸收的熱量,提供動力學(xué)和熱力學(xué)參數(shù)。
熒光能量共振轉(zhuǎn)移(FRET)
FRET基于供體和受體熒光團之間的距離依賴性能量轉(zhuǎn)移,用于檢測分子接近程度。
熒光偏振(FP)
FP通過測量分子旋轉(zhuǎn)引起的偏振光變化來檢測結(jié)合事件。
時間分辨熒光(TRF)
TRF利用鑭系元素標(biāo)記的長壽命熒光,減少背景信號,提高檢測靈敏度。
Western Blot
Western Blot是一種定性和半定量蛋白質(zhì)的技術(shù),可以通過抗體檢測特定蛋白質(zhì)的存在。
拉下實驗(Pull-down)
拉下實驗通常使用固定在固相載體上的親和標(biāo)簽或抗體來捕獲目標(biāo)蛋白,并鑒定其互作伙伴。
免疫共沉淀(Co-IP)
Co-IP利用抗體從細胞裂解液中沉淀出目標(biāo)蛋白及其互作蛋白,用于研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)互作。
酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)
ELISA是一種基于抗體的檢測方法,可用于檢測和量化特定抗原或抗體的存在。
細胞原位生物大分子互作檢測
如Attana Cell 200,可在細胞層面上進行實時原位分子結(jié)合動力學(xué)檢測。
選擇哪種技術(shù)取決于具體的實驗需求,如樣品類型、需要的信息(如親和力、動力學(xué)參數(shù))、成本和實驗室資源等。在實際應(yīng)用中,e測試研究人員可能會結(jié)合使用幾種不同的技術(shù),以獲得全面的數(shù)據(jù)集。
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