小鼠病理組織切片制作是病理學(xué)研究中的一項(xiàng)基礎(chǔ)技術(shù)，主要用于觀察組織結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)的變化，從而幫助診斷疾病、了解疾病機(jī)制或評(píng)估治療效果。以下是小鼠病理組織切片制作的基本步驟：

　　1. 樣品準(zhǔn)備

　　取材：根據(jù)研究需要選擇合適的小鼠，并在適當(dāng)?shù)穆樽硐芦@取所需組織。取材時(shí)應(yīng)盡量減少對(duì)組織的損傷。

　　固定：將取出的組織迅速放入固定液(如10%中性緩沖福爾馬林)中固定，以保持組織結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變。固定時(shí)間依據(jù)組織類型而定，通常為數(shù)小時(shí)至過(guò)夜。

　　2. 脫水與透明化

　　脫水：使用一系列遞增濃度的乙醇溶液逐步去除組織中的水分。

　　透明化：用二甲苯等透明劑處理組織，以便后續(xù)石蠟包埋。

　　3. 浸蠟與包埋

　　浸蠟：在60°C左右的石蠟中浸泡組織，使石蠟滲入組織內(nèi)部。

　　包埋：將浸蠟后的組織置于金屬模具中，倒入融化的石蠟，冷卻凝固形成組織塊。

　　4. 切片

　　使用旋轉(zhuǎn)式切片機(jī)將包埋好的組織切成薄片，厚度通常為4-5微米，然后平鋪于載玻片上。

　　5. 染色

　　常見的染色方法是H&E染色(蘇木精-伊紅染色)，通過(guò)這種染色可以清晰地顯示細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的形態(tài)。

　　脫蠟：先用二甲苯脫去切片上的石蠟。

　　復(fù)水：依次通過(guò)不同濃度的乙醇溶液回到水中。

　　染色：先用蘇木精染色，再用鹽酸酒精分化，接著氨水藍(lán)化，z后用伊紅染色。

　　脫水、透明、封片：染色完成后，再次經(jīng)過(guò)乙醇脫水、二甲苯透明處理后，滴加封片劑并蓋上蓋玻片。

　　6. 觀察與分析

　　將制備好的切片放在顯微鏡下進(jìn)行觀察，必要時(shí)拍照記錄，并進(jìn)行定量或定性的分析。