免疫組化檢查是一種通過抗原-抗體特異性結(jié)合反應(yīng)，檢測(cè)組織或細(xì)胞中特定蛋白質(zhì)(如腫瘤標(biāo)志物、受體、酶等)表達(dá)情況的病理學(xué)技術(shù)。廣泛應(yīng)用于疾病診斷(尤其是腫瘤)、分型、預(yù)后評(píng)估及治療靶點(diǎn)篩選。以下是免疫組化檢查的詳細(xì)解析：

　　一、基本原理

　　抗原-抗體反應(yīng)：

　　使用針對(duì)目標(biāo)蛋白的特異性抗體(一抗)與組織切片中的抗原結(jié)合。

　　通過標(biāo)記二抗(如辣根過氧化物酶HRP或熒光染料)顯色，定位目標(biāo)蛋白的表達(dá)位置(細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜)。

　　信號(hào)放大系統(tǒng)：

　　常用鏈霉親和素-生物素(Streptavidin-Biotin)系統(tǒng)增強(qiáng)檢測(cè)靈敏度。

　　二、主要應(yīng)用

　　1. 腫瘤診斷與分型

　　鑒別腫瘤來源：

　　如細(xì)胞角蛋白(CK)陽(yáng)性提示上皮源性腫瘤，波形蛋白(Vimentin)陽(yáng)性提示間葉組織腫瘤。

　　分子分型：

　　乳腺癌：ER(雌激素受體)、PR(孕激素受體)、HER2(人表皮生長(zhǎng)因子受體2)檢測(cè)指導(dǎo)治療。

　　淋巴瘤：CD20、CD3、CD30等標(biāo)記物區(qū)分亞型。

　　2. 預(yù)后評(píng)估

　　增殖活性：Ki-67指數(shù)(高表達(dá)提示腫瘤增殖活躍，預(yù)后較差)。

　　轉(zhuǎn)移潛能：E-鈣黏蛋白(E-cadherin)丟失與腫瘤侵襲性相關(guān)。

　　3. 治療靶點(diǎn)篩選

　　靶向治療：

　　HER2陽(yáng)性乳腺癌可使用曲妥珠單抗(赫賽汀)。

　　PD-L1表達(dá)水平預(yù)測(cè)免疫檢查點(diǎn)抑制劑(如帕博利珠單抗)療效。

　　4. 感染性疾病

　　病原體檢測(cè)：如HPV(人乳頭瘤病毒)E6/E7蛋白、EB病毒LMP1蛋白。

　　三、檢查步驟

　　1. 樣本制備

　　組織處理：

　　活檢或手術(shù)切除組織經(jīng)10%中性福爾馬林固定(6~48小時(shí))。

　　脫水、石蠟包埋后切片(厚度3~5 μm)。

　　切片要求：貼附于防脫載玻片，60℃烘烤1小時(shí)增強(qiáng)附著力。

　　2. 免疫染色流程

　　脫蠟與水化：二甲苯脫蠟，梯度乙醇水化。

　　抗原修復(fù)：

　　高溫高壓法(檸檬酸緩沖液，pH 6.0)或酶消化法(胰蛋白酶)暴露抗原表位。

　　阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：3% H?O?處理10分鐘。

　　一抗孵育：滴加特異性一抗，濕盒中4℃過夜或室溫1小時(shí)。

　　二抗孵育：HRP標(biāo)記的二抗(如山羊抗兔IgG)，室溫30分鐘。

　　顯色：DAB(3,3'-二氨基聯(lián)苯胺)顯色，顯微鏡下控制反應(yīng)時(shí)間。

　　復(fù)染與封片：蘇木素復(fù)染細(xì)胞核，中性樹膠封片。

　　3. 結(jié)果判讀

　　陽(yáng)性信號(hào)：棕色(DAB)或熒光標(biāo)記，需明確定位(如HER2為細(xì)胞膜染色)。

　　評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)(以HER2為例)：

　　四、優(yōu)缺點(diǎn)分析

　　免疫組化檢查費(fèi)用一般多少?免疫組化檢查的費(fèi)用因地區(qū)、醫(yī)院等級(jí)、檢測(cè)項(xiàng)目數(shù)量和所用抗體種類等因素差異較大，如需精準(zhǔn)報(bào)價(jià)，建議直接聯(lián)系檢測(cè)機(jī)構(gòu)，并提供具體檢測(cè)抗體名稱以獲取詳細(xì)費(fèi)用清單。