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tunel染色是一種用于檢測細(xì)胞凋亡的技術(shù),全稱為“脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法”(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase Mediated dUTP Nick End Labeling)。這項(xiàng)技術(shù)基于細(xì)胞凋亡過程中DNA的斷裂,產(chǎn)生大量的3'-OH末端。通過脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的作用,可以將熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素標(biāo)記的脫氧核糖核苷酸標(biāo)記到這些3'-OH末端上,從而實(shí)現(xiàn)對凋亡細(xì)胞的可視化檢測。
TUNEL染色的基本原理
DNA斷裂:在細(xì)胞凋亡過程中,染色體DNA會發(fā)生雙鏈或單鏈斷裂,產(chǎn)生3'-OH末端。
末端標(biāo)記:TdT可以在這些3'-OH末端將熒光素標(biāo)記的脫氧核糖核苷酸(通常是dUTP)添加上去。
檢測:通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞術(shù)等技術(shù)檢測標(biāo)記的DNA片段,從而定位和量化凋亡細(xì)胞。
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