生物膜干涉(Bio-Layer Interferometry, BLI)是一種用于實(shí)時監(jiān)測和量化生物分子間相互作用的技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)特別適用于檢測蛋白、抗體、核酸、細(xì)胞受體以及其他生物大分子間的結(jié)合事件。BLI的基本原理是通過檢測生物膜厚度的變化來間接測量分子結(jié)合的動力學(xué)參數(shù)，如結(jié)合常數(shù)(Ka或kon)和解離常數(shù)(Kd或koff)，從而計(jì)算出親和力(KD)和濃度信息。

　　下面是BLI技術(shù)的簡要工作流程：

　　生物傳感器準(zhǔn)備：一個光纖生物傳感器被固定在一個裝置上，其末端覆蓋有一層薄薄的生物膜。這層生物膜通常是通過化學(xué)反應(yīng)預(yù)先固定了某種目標(biāo)生物分子(捕獲分子)。

　　白光發(fā)射：儀器發(fā)射白光到生物傳感器的表面，光線在生物膜和周圍介質(zhì)的界面上發(fā)生反射，形成干涉圖案。

　　反射光譜記錄：儀器收集反射回來的光譜，并記錄不同波長的光強(qiáng)度。由于生物膜厚度的變化會影響光的干涉模式，因此反射光譜會隨著分子結(jié)合事件的發(fā)生而改變。

　　分子結(jié)合：當(dāng)一個未標(biāo)記的分析物(如蛋白質(zhì)、抗體或核酸)與傳感器上的捕獲分子結(jié)合時，生物膜的厚度會增加，引起反射光譜的位移。

　　實(shí)時監(jiān)測：系統(tǒng)實(shí)時監(jiān)測這些光譜位移，從而跟蹤分子結(jié)合和解離的動態(tài)過程。

　　數(shù)據(jù)分析：通過軟件分析反射光譜的位移，可以計(jì)算出結(jié)合和解離的速率常數(shù)，進(jìn)而推算出親和力(KD)等重要參數(shù)。

　　BLI技術(shù)的優(yōu)勢包括：

　　不需要對樣品進(jìn)行標(biāo)記，減少了樣品制備的復(fù)雜性;

　　實(shí)時監(jiān)測，能夠提供動力學(xué)和親和力的詳細(xì)信息;

　　需要的樣品量很少，適合珍貴樣品的檢測;

　　操作簡單，自動化程度高，可以進(jìn)行高通量篩選。

　　BLI技術(shù)廣泛應(yīng)用于藥物發(fā)現(xiàn)、抗體篩選、蛋白質(zhì)組學(xué)、疾病標(biāo)志物識別等領(lǐng)域。其中，Octet平臺是基于BLI技術(shù)的代表性系統(tǒng)，在生物醫(yī)學(xué)研究和制藥行業(yè)中得到了廣泛應(yīng)用。