免疫沉淀(Immunoprecipitation，IP)技術是一種通過使用能夠與蛋白質結合的抗體從溶液中分離出特定蛋白質的技術，是抗原純化和檢測中使用z廣泛的方法之一。通過添加不溶形式的抗體結合蛋白(例如與瓊脂糖漿液或新近流行的磁珠綴合的蛋白A或Protein G)從溶液中去除抗體-蛋白復合物。免疫沉淀法使用抗原特異性抗體從復合抗原溶液中分離目標抗原，并使用聚丙烯酰胺凝膠SDS-PAGE法分析復合蛋白混合物中存在的抗體反應性抗原的數(shù)量和大小。免疫沉淀IP使研究人員能夠測量蛋白質混合物中給定蛋白質的分子量和數(shù)量，識別蛋白質激活狀態(tài)和翻譯后蛋白質修飾，并捕獲蛋白質結合伴侶。免疫沉淀測定法可檢測靶蛋白與其他蛋白或核酸的相互作用，其中免疫共沉淀法Co-IP蛋白互作分析法常用作靶蛋白的檢測。

　　Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法是一項功能強大的技術，廣泛應用于發(fā)現(xiàn)和檢測蛋白質-蛋白質相互作用。Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的原理是利用抗原-抗體相互作用拉下靶蛋白的方式推定相互作用的蛋白。具體而言，將目標蛋白的抗體固定在親和樹脂中，然后將其暴露于設計的蛋白混合物或細胞提取液中，與目標蛋白質有強相互作用的蛋白質或蛋白質復合物將被共沉淀。這些相互作用蛋白的身份和數(shù)量可以通過后續(xù)基于質譜的互作蛋白質譜分析方法進行鑒定。

　　Co-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析法的一般程序如下：

　　? 制備蛋白質混合物，細胞裂解液或組織提取物

　　? 用抗體結合的親和珠孵育蛋白質混合物，細胞裂解物或組織提取物

　　? 通過多個洗滌步驟清除未結合的蛋白質

　　? 通過SDS-PAGE，蛋白質印跡或質譜(MS)分析檢測相互作用蛋白