行業(yè)信息
等溫滴定量熱法(ITC)能夠直接測量糖類與其他分子的相互作用過程,適用于多種糖類相關(guān)的結(jié)合研究,其主要應(yīng)用場景包括:
一、適用領(lǐng)域
?糖類與蛋白質(zhì)相互作用?
ITC 可直接檢測糖類(如單糖、寡糖、多糖)與蛋白質(zhì)結(jié)合時(shí)的熱力學(xué)參數(shù)(結(jié)合常數(shù) KD、焓變 ΔH、熵變 ΔS),例如凝集素-糖識別、酶-底物結(jié)合等?。
?糖類與核酸相互作用?
可研究糖類(如核苷酸糖)與 DNA/RNA 的結(jié)合機(jī)制,分析穩(wěn)定性和特異性?。
?糖類與小分子/藥物結(jié)合?
適用于藥物載體(如環(huán)糊精)包埋糖分子的熱力學(xué)分析,或藥物-糖復(fù)合物的親和力測定?。
?酶促糖基化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)?
通過監(jiān)測酶(如糖基轉(zhuǎn)移酶)催化糖基轉(zhuǎn)移反應(yīng)的熱變化,計(jì)算反應(yīng)速率和米氏常數(shù)?。
二、技術(shù)優(yōu)勢
?無需標(biāo)記?:直接檢測天然狀態(tài)樣品,避免熒光標(biāo)記對糖結(jié)構(gòu)的影響?。
?全面參數(shù)?:單次實(shí)驗(yàn)同步獲得結(jié)合常數(shù)、化學(xué)計(jì)量比(n)、焓變與熵變?。
?廣泛適用性?:對溶液透光度、粘度要求低,適合多糖等復(fù)雜體系?。
三、注意事項(xiàng)
?樣品純度?:糖類易吸濕或降解,需高純度干燥樣品以減少背景噪聲。
?濃度設(shè)計(jì)?:建議糖類(大分子)置于樣品池,滴定物濃度需顯著高于結(jié)合常數(shù)(c > 10×KD)?。
?熱效應(yīng)微弱?:糖類結(jié)合常伴隨微弱放熱/吸熱,需優(yōu)化儀器靈敏度?。
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