一、概述

　　土壤酶活性熒光法是一種直觀、快速、靈敏、簡(jiǎn)便、易操作和結(jié)果可靠的酶活性測(cè)定方法。其基本原理是，利用一定條件下土壤酶的熒光特性進(jìn)行測(cè)定，能夠?qū)ν寥牢⑸锎x活動(dòng)進(jìn)行直接的檢測(cè)和評(píng)價(jià)。該方法能夠準(zhǔn)確、快速地反應(yīng)土壤中微生物類群數(shù)量和質(zhì)量的變化，同時(shí)也是評(píng)價(jià)土壤生態(tài)系統(tǒng)功能變化的主要方法之一。因此，該方法得到了廣泛的應(yīng)用和發(fā)展，特別是在土壤環(huán)境監(jiān)測(cè)、土壤質(zhì)量評(píng)價(jià)、肥力管理等領(lǐng)域。

　　二、基本步驟

　　1. 取樣：從實(shí)驗(yàn)需要的樣地處，均勻、隨機(jī)采集土壤樣品，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要分成不同深度的樣品。將土壤樣品倒入干凈的塑料袋或試管中，清除其中的雜質(zhì)如大顆粒物、石頭、枯枝等。

　　2. 制樣：將采集的土壤樣品均勻混合，然后將其壓成小薄片或小球狀。加入二甲亞砜(DMSO)等溶液，60℃水浴恒溫2小時(shí)，離心，取上清液待用。

　　3. 檢測(cè)：根據(jù)操作要求取一定量的上清液加入熒光底物，水浴恒溫反應(yīng)30-60分鐘，根據(jù)比色計(jì)或熒光計(jì)檢測(cè)熒光強(qiáng)度。

　　4. 數(shù)據(jù)處理：根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蛿?shù)據(jù)需求，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，如計(jì)算酶活性指標(biāo)、構(gòu)建模型等等。

　　三、注意事項(xiàng)

　　1. 在取樣過(guò)程中要嚴(yán)格控制干濕程度、深度、取樣位置和樣品數(shù)量等參數(shù)，以保證實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性和準(zhǔn)確性。

　　2. 制樣過(guò)程中盡可能地避免氧氣和光的干擾，以保證酶的穩(wěn)定性和活性。

　　3. 檢測(cè)過(guò)程中需要控制反應(yīng)時(shí)間和溫度，以及熒光底物和反應(yīng)液的摩爾濃度和配比。

　　4. 數(shù)據(jù)處理階段需要結(jié)合實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮湍Ｐ鸵筮x擇合適的統(tǒng)計(jì)方法、回歸分析方法等。