行業(yè)信息
DNA合成檢測(cè)
利用BrdU/EdU等嵌入DNA的方式,通過(guò)后續(xù)染色或抗體標(biāo)記來(lái)檢測(cè)DNA的合成,可以用來(lái)反映細(xì)胞增殖情況。
實(shí)驗(yàn)步驟:加入BrdU或EdU到細(xì)胞培養(yǎng)基中,讓其嵌入新合成的DNA,然后利用特定的抗體進(jìn)行檢測(cè),通過(guò)流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡觀察標(biāo)記的細(xì)胞,進(jìn)行定量分析。
代謝活性物質(zhì)檢測(cè)
如MTT和CCK-8方法,基于細(xì)胞內(nèi)琥珀酸脫氫酶活性,將無(wú)色的底物轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物,通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物的量來(lái)評(píng)估細(xì)胞的活性和增殖能力。
實(shí)驗(yàn)步驟:將MTT或CCK-8溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)板中,一定時(shí)間后,測(cè)定溶解產(chǎn)物的吸光度,以此推算細(xì)胞活性或數(shù)量。
細(xì)胞增殖相關(guān)抗原檢測(cè)
通過(guò)特定的細(xì)胞周期相關(guān)蛋白,如Ki-67和PCNA的表達(dá)來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞增殖。
實(shí)驗(yàn)步驟:利用針對(duì)Ki-67或PCNA的抗體進(jìn)行免疫熒光染色,觀察和計(jì)算標(biāo)記陽(yáng)性的細(xì)胞比例,以評(píng)估細(xì)胞的增殖活性。
ATP濃度檢測(cè)
ATP作為細(xì)胞能量的直接來(lái)源,其濃度的變化可以反映細(xì)胞的活力和增殖狀態(tài)。
實(shí)驗(yàn)步驟:使用特定的生物發(fā)光試劑,如CellTiter-Glo,與細(xì)胞共同培養(yǎng),通過(guò)測(cè)定發(fā)光強(qiáng)度來(lái)反映細(xì)胞內(nèi)ATP的濃度,進(jìn)而評(píng)價(jià)細(xì)胞的活力。
當(dāng)然,每種細(xì)胞增殖與活性檢測(cè)方法都各有優(yōu)缺點(diǎn),我們還得根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)的具體需求選擇更合適的方法,醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)公司e測(cè)試也建議,綜合使用多種方法進(jìn)行交叉驗(yàn)證,這樣可以獲得更準(zhǔn)確、全面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
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