根據(jù)國際細(xì)胞外囊泡學(xué)會(huì)(ISEV)在2014年的提議，外泌體的鑒定主要有三種形式：透射電鏡(TEM)、粒徑分析( NTA)、蛋白標(biāo)志物(WB)。

　　1、外泌體形態(tài)

　　透射電子顯微鏡(Transmission Electron Microscope，簡稱TEM)，可以看到在光學(xué)顯微鏡下無法看清的小于0.2um的細(xì)微結(jié)構(gòu)，這些結(jié)構(gòu)稱為亞顯微結(jié)構(gòu)或超微結(jié)構(gòu)。雙層囊膜結(jié)構(gòu)(亞顯微結(jié)構(gòu))是外泌體重要標(biāo)志之一，所以透射電鏡作為外泌體表征檢測方式之一，可以很好的拍出外泌體雙層囊膜結(jié)構(gòu)，用來觀察外泌體形態(tài)。

　　2、外泌體粒徑及濃度

　　通過納米顆粒示蹤分析(Nanoparticle Tracking Analysis，簡稱NTA)技術(shù)，可以對30-1000nm范圍內(nèi)的納米顆粒進(jìn)行快速實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)檢測，可對抽提獲得的外泌體進(jìn)行粒徑大小及數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，以及初步質(zhì)量評估。該技術(shù)易用、快速、穩(wěn)健、準(zhǔn)確，是對現(xiàn)有外泌體鑒定方法的一個(gè)良好補(bǔ)充。我司所使用的儀器是德國ParticleMetrix公司所生產(chǎn)的Zetaview-PMX120-Z。

　　3、外泌體表面標(biāo)志物

　　Western blot(WB)是通過抗原抗體特異性結(jié)合的原理，對外泌體標(biāo)志蛋白進(jìn)行檢測，從蛋白質(zhì)層面對外泌體進(jìn)行鑒定。常用的外泌體標(biāo)志蛋白包括CD63、TSG101及Alix等。

來源網(wǎng)絡(luò)