實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR，qPCR)是指在PCR體系中加入熒光染料或熒光探針，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，最后通過(guò)CT值和標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。具有PCR技術(shù)快速、靈敏的特點(diǎn)，同時(shí)還具有更高的特異性、實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)和可重復(fù)精確定量等優(yōu)勢(shì)。

　　熒光染料法：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單(僅需2個(gè)引物，無(wú)需設(shè)計(jì)探針)，初始成本低，靈敏度高，但需要進(jìn)行熔解曲線分析檢驗(yàn)擴(kuò)增反應(yīng)的特異性。適用于非特異性檢測(cè)(專一性要求不高或高通量檢測(cè))。

　　探針?lè)ǎ?/b>有高特異性(引物和探針共同于模板結(jié)合)，高信噪比，能進(jìn)行多重反應(yīng)。但成本高，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)繁瑣。適用于擴(kuò)增序列專一檢測(cè)。