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細(xì)胞黏附性是維持組織結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的基本條件,也是細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和發(fā)揮功能的調(diào)節(jié)因素,并且對(duì)細(xì)胞的增殖、分化有重要影響。通常可分為兩類(lèi),即細(xì)胞與細(xì)胞黏附和細(xì)胞與基質(zhì)黏附。機(jī)體內(nèi)許多細(xì)胞,如上皮細(xì)胞,需要牢固地定在某處發(fā)揮功能;另一些細(xì)胞,如白細(xì)胞,活躍運(yùn)動(dòng),就需要不斷調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附。細(xì)胞黏附性的改變?cè)谀[瘤轉(zhuǎn)移過(guò)程中也發(fā)揮著重要作用。體外測(cè)定細(xì)胞粘附性實(shí)驗(yàn)方法的建立,為粘附分子的發(fā)現(xiàn)、細(xì)胞間粘附影響的研究提供了極為有效的方法。
細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)步驟
1. 用無(wú)血清培養(yǎng)基RPMI-1640將Matrigel(人工基底膜膠)配制成0.04μg/μl的人工基底膜膠備用,96孔板每孔中鋪Matrigel 2μg,放于超凈臺(tái)中風(fēng)干過(guò)夜。
2. 在96孔板加入適量無(wú)血清RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)液(或PBS或生理鹽水),放置60-90分鐘。
3. 洗去多余的膠,取培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞以1×104/孔接種在鋪膠的96孔板中,設(shè)3個(gè)重復(fù)孔,放入37攝氏度5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。
4. 加藥和模型藥,培養(yǎng)48h。
5. MTT檢測(cè):吸掉液體,然后每孔加入MTT 10μL,繼續(xù)培養(yǎng)4h,吸掉液體,每孔加入二甲基亞砜(DMSO)100μl,在振蕩器上振蕩5-10分鐘,在顯微鏡下觀察無(wú)晶體,然后在酶標(biāo)儀490nm波長(zhǎng)讀取數(shù)值。
e測(cè)試生命科學(xué)服務(wù),包含顯微成像平臺(tái)、形態(tài)病理平臺(tái)、細(xì)胞生物平臺(tái)、分子蛋白平臺(tái)、生理生化平臺(tái)、微生物平臺(tái)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)平臺(tái)及組學(xué)平臺(tái),可接收樣品范圍廣泛,涵蓋動(dòng)物、植物、微生物,觀測(cè)納米材料(或藥物等)在有機(jī)體內(nèi)(微生物/植物/細(xì)胞等)的分布、外泌體形貌、含水樣品斷面/表面形貌,為生命、醫(yī)藥、食品、以及材料應(yīng)用等客戶(hù)提供相關(guān)檢測(cè)。
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