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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包:細(xì)胞增殖與細(xì)胞活性檢測(cè)方法

更新時(shí)間:2024-10-24 點(diǎn)擊次數(shù):0 所屬欄目:行業(yè)信息

  首先我們要清楚的是,細(xì)胞增殖和細(xì)胞活性檢測(cè)兩者概念上還是有區(qū)別的。細(xì)胞增殖是指細(xì)胞在周期調(diào)控的因子下,通過DNA復(fù)制等反應(yīng),完成細(xì)胞分裂的過程,而細(xì)胞活性則是判斷體外培養(yǎng)細(xì)胞在某些條件下是否能正常生長(zhǎng)的重要指標(biāo),那問題來(lái)了,細(xì)胞增殖與細(xì)胞活性檢測(cè)方法有哪些?流式能夠檢測(cè)嗎?

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  下面就由e測(cè)試來(lái)給大家說說吧!

  一般實(shí)驗(yàn)室常用的方法有以下幾種:

  DNA合成檢測(cè):利用BrdU/EdU等嵌入DNA的方式,通過后續(xù)染色或抗體標(biāo)記來(lái)檢測(cè)DNA的合成,反映細(xì)胞增殖情況。BrdU/EdU檢測(cè)法,則是通過加入BrdU或EdU到細(xì)胞培養(yǎng)基中,讓其嵌入新合成的DNA,然后利用特定的抗體進(jìn)行檢測(cè),長(zhǎng)沙科研實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)公司湘元生物實(shí)驗(yàn)室提醒,這時(shí)候就會(huì)用到流式檢測(cè)儀,因?yàn)槲覀円ㄟ^流式細(xì)胞儀或熒光顯微鏡觀察標(biāo)記的細(xì)胞,進(jìn)行定量分析。

  代謝活性物質(zhì)檢測(cè):如MTT和CCK-8方法,基于細(xì)胞內(nèi)琥珀酸脫氫酶活性,將無(wú)色的底物轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物,通過測(cè)定產(chǎn)物的量來(lái)評(píng)估細(xì)胞的活性和增殖能力。這個(gè)方法就簡(jiǎn)單了,只需要將MTT或CCK-8溶液加入到細(xì)胞培養(yǎng)板中,一定時(shí)間后,測(cè)定溶解產(chǎn)物的吸光度,就能推算細(xì)胞活性或數(shù)量。

  細(xì)胞增殖相關(guān)抗原檢測(cè):通過特定的細(xì)胞周期相關(guān)蛋白,如Ki-67和PCNA的表達(dá)來(lái)評(píng)價(jià)細(xì)胞增殖。此類方法就是利用針對(duì)Ki-67或PCNA的抗體進(jìn)行免疫熒光染色,觀察和計(jì)算標(biāo)記陽(yáng)性的細(xì)胞比例,以評(píng)估細(xì)胞的增殖活性。長(zhǎng)沙科研實(shí)驗(yàn)外包服務(wù)公司湘元生物實(shí)驗(yàn)室提醒,在使用BrdU/EdU或Ki-67/PCNA檢測(cè)時(shí),選擇高質(zhì)量和特異性強(qiáng)的抗體至關(guān)重要。

  ATP濃度檢測(cè):ATP作為細(xì)胞能量的直接來(lái)源,其濃度的變化可以反映細(xì)胞的活力和增殖狀態(tài)。所以我們就可以使用特定的生物發(fā)光試劑,如CellTiter-Glo,與細(xì)胞共同培養(yǎng),通過測(cè)定發(fā)光強(qiáng)度來(lái)反映細(xì)胞內(nèi)ATP的濃度,進(jìn)而評(píng)價(jià)細(xì)胞的活力。

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